水稻胚乳細(xì)胞生物反應(yīng)器高效重組蛋白表達(dá)平臺OryzHiExp特點(diǎn)介紹
選擇具有儲藏功能的水稻胚乳細(xì)胞作為生物反應(yīng)器,采用胚乳細(xì)胞特異性表達(dá)的啟動子、人工定點(diǎn)突變增強(qiáng)啟動子的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白定向儲存、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減負(fù)和密碼子優(yōu)化等綜合技術(shù),使重組蛋白特異性地在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá),并定向儲存在蛋白體中,獲得了較高的重組蛋白的表達(dá),使得重組蛋白產(chǎn)量由mg級別提高到20g級別。
項(xiàng)目實(shí)施階段
階段 |
具體項(xiàng)目 |
實(shí)驗(yàn)周期 |
第一階段
獲取目的基因品系種子 |
基因優(yōu)化合成 |
1個月 |
載體構(gòu)建 |
1個月 |
愈傷組織誘導(dǎo)/篩選高表達(dá)量植株/表達(dá)量檢測 |
4個月 |
幼苗移栽與培育/獲得10-20株陽性T0代種子 |
6個月 |
第二階段
獲得可穩(wěn)定遺傳純合子種子 |
T0代種植篩選/獲得陽性T1代種子 |
4個月 |
篩選最少5株以上高表達(dá)量的植株品系 |
1個月 |
T1代高表達(dá)純合子種植/篩選純合品系/獲得T2代種子 |
4個月 |
表達(dá)量與蛋白質(zhì)生物活性分析鑒定 |
1個月 |
第三階段
純化工藝小試 |
設(shè)計(jì)和開發(fā)符合純度需求的小試純化工藝開發(fā),獲得mg-g級的純化小試工藝樣品 |
6個月 |
可以實(shí)現(xiàn)
1、大分子蛋白,分子量可以覆蓋從100-1000個氨基酸大??;
2、小分子多肽:分子量小于100個氨基酸;
3、每kg糙米的目標(biāo)蛋白表達(dá)量在0.1g-10g。
特別適用于:
1、生物制藥,比如疫苗、靶向蛋白/抗體藥、非靶向治療蛋白藥物;
2、工業(yè)生物酶,比如診斷用酶、生物制藥工藝用酶;
3、生命科學(xué)研究工具酶等產(chǎn)品。